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產(chǎn)品詳情
  • 產(chǎn)品名稱:ATCC CCL-75(WI-38)

  • 產(chǎn)品型號:
  • 產(chǎn)品廠商:乾思生物
  • 產(chǎn)品文檔:
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簡單介紹:
ATCC CCL-75(WI-38)
詳情介紹:

WI-38細胞ATCC CCL-75標準細胞株基本信息

出品公司: ATCC
細胞名稱: WI-38細胞, ATCC CCL-75細胞, WI38細胞, 人胚肺細胞
細胞又名: Wi-38; WI 38; WI38; Wistar Institute-38; AG06814-J; AG06814-M; AG06814-N
存儲人: L Hayflick
種屬來源:
組織來源:
疾病特征: 正常
細胞形態(tài): 成纖維細胞樣
生長特性: 貼壁生長
培養(yǎng)基: MEM培養(yǎng)基(GIBCO,貨號41500034),90%;FBS,10%。
產(chǎn)品目錄號: CCL-75
生長條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%; 溫度:37  ℃, 
傳代方法: 1:2至1:6,每周2次。
凍存條件: 90% 完全培養(yǎng)基+10% DMSO,液氮儲存
支原體檢測: 陰性
**等級: 1
應用:
該細胞系是一個合適的轉染宿主。
該細胞系可用于viruscide測試。
STR:
Amelogenin: X
CSF1PO: 10,12
D13S317: 11
D16S539: 11,12
D5S818: 10
D7S820: 9,11
THO1: 8,9.3
TPOX: 8
vWA: 19,20
同工酶:
G6PD, B
 
備注:
Nucleotide (GenBank) : AA762049 EST01 Human Lung cDNA Library Homo sapiens cDNA clone 3I35 5', mRNA sequence.
 
參考文獻:
Sugarman BJ, et al. Recombinant human tumor necrosis factor-alpha: effects on proliferation of normal and transformed cells in vitro. Science 230: 943-945, 1985. PubMed: 3933111
 
Hayflick L, Moorhead PS. The serial cultivation of human diploid cell strains. Exp. Cell Res. 25: 585-621, 1961. PubMed: 13905659
 
Hayflick L. The limited in vitro lifetime of human diploid cell strains. Exp. Cell Res. 37: 614-636, 1965. PubMed: 14315085
 
Hayflick L, et al. Preparation of poliovirus vaccines in a human fetal diploid cell strain. Am. J. Hyg. 75: 240-258, 1962. PubMed: 13905660
 
First International Conference on Vaccines against Viral and Rickettsial Diseases of Man. Pan Am. Health Organ. Off. Doc. 147: 581, 1967.
 
Tomasek JJ, et al. Gelatinase A activation Is regulated by the organization of the polymerized actin cytoskeleton. J. Biol. Chem. 272: 7482-7487, 1997. PubMed: 9054450
 
細胞圖片:
WI-38細胞圖片


WI-38細胞ATCC CCL-75人胚肺細胞特點和簡介

WI-38人二倍體細胞系來自妊娠3個月的正常胚胎肺組織。 該細胞系是首株用于人類疫苗制備的人二倍體細胞系。 培液中添加TNF alpha可以促進細胞生長。 在本庫通過支原體檢測。 在本庫通過STR檢測。

WI-38細胞ATCC CCL-75人胚肺細胞接受后處理

1) 收到細胞后,請檢查是否漏液 ,如果漏液,請拍照片發(fā)給我們。
  2) 請先在顯微鏡下確認細胞生長 狀態(tài),去掉封口膜并將T25瓶置于37℃培養(yǎng)約2-3h。
  3) 棄去T25瓶中的培養(yǎng)基,添加 6ml本公司附帶的完全培養(yǎng)基。
  4) 如果細胞密度達80%-90%請及 時進行細胞傳代,傳代培養(yǎng)用6ml本公司附帶的完全培養(yǎng) 基。
  5) 接到細胞次日,請檢查細胞是 否污染,若發(fā)現(xiàn)污染或疑似污染,請及時與我們取得聯(lián) 系。
 

WI-38細胞ATCC CCL-75人胚肺細胞培養(yǎng)操作

1)復蘇細胞:將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然 后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或將 細胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng) 過夜)。**天換液并 檢查細胞密度。
  2)細胞傳代:如果細胞密度達 80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。        1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。
       2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶 中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分 變圓并脫落 ,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。      
     3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
       4. 將細胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中 或者瓶中。
  3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類;
        1. 細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,細胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。
        2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細胞, 根據(jù)細胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細胞密度不低于1x106/ml,每支凍 存管凍存 1ml 細胞懸液,注意凍 存管做好標識。
       3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個小時 以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

WI-38細胞ATCC CCL-75人胚肺細胞培養(yǎng)注意事項

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述 現(xiàn) 象發(fā)生請及 時和我們聯(lián)系。
  2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、 所 需細胞因子 等,確保細胞培養(yǎng)條件一致。若由于培養(yǎng)條件不一致而導致細胞出現(xiàn)問 題,責任由客戶 自行承擔。
  3.   用 75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題貼壁細 胞會有少量 從瓶 壁脫落,將細胞置于培養(yǎng)箱內靜置培養(yǎng) 4~6 小時,再取出觀察。此時多數(shù)細胞均 會貼 壁,若細胞仍不能貼壁請用臺盼藍 染色測定細胞活力,如果證實細胞活力正常, 請將細胞離心后用新鮮 培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結果顯示細胞無活 力,請拍下 照片及時和我們聯(lián)系,信息確認后我們?yōu)?您再免費寄送一次。
  4.   靜置細胞貼壁后,請將細胞瓶內的培養(yǎng)基倒出,留 6~8mL 維持細胞正常培 養(yǎng),待細 胞匯 合度  80%左右時正常傳代。
  5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。培養(yǎng)瓶內多余的培養(yǎng)基可收集備用,細 胞 傳代時可以 一定比例和客戶自備的培養(yǎng)基混合,使細胞逐漸適應培養(yǎng)條件。
  6.   建議客戶收到細胞后前 3 天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和 Procell 技術 部 溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián) 系 ,告知細胞的具體情況,以便我們 的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。
  7.該細胞僅供科研使用。


WI-38細胞ATCC CCL-75標準細胞株說明書pdf版和相關資料下載

WI-38細胞ATCC CCL-75標準細胞株應用舉例

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